细胞基因编辑
背景介绍
稳定细胞系在基因功能研究、重组蛋白制备、药物筛选及靶点验证、肿瘤治疗等生物学研究中发挥重要作用。我司具有丰富的CRISPR/Cas9基因编辑项目经验，致力于为广大客户提供定制的基因编辑细胞系构建服务。CRISPR/Cas9相比于传统的ZFN和TALEN提高了基因编辑的准确性和特异性，它的效率是传统ZFN和TALEN系统的三到四倍。而且，只需导入几个不同的引导RNA（sgRNA），即可编辑多个基因，该技术已广泛用于构建敲除细胞系。
实验流程
客户在线下单—订单/实验材料确认—靶点设计—基因编辑载体构建—瞬时转染哺乳动物细胞—抗生素筛选并测序—培养皿筛单克隆细胞并测序—96孔板筛单克隆细胞并测序—得到敲除目的基因的单克隆细胞系
可做细胞系及服务项目
客户下单及项目信息填写
在我司官网http://www.biorun.com/进行注册或登录，请客户按照页面提示填写项目名称、选择项目类型、填写个人信息及联系方式，提交项目所需要的具体信息，包括：
1、 细胞类型；
2、 靶向基因序列信息；
3、 尽可能丰富的相关资料、文献。
实验信息
实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户，并发送实验报告查看网址。实验结题后，实验报告、检测结果可在线查看或打印，并永久保留。
实验交付内容
1、基因编辑细胞系一份；
2、检测测序结果；
3、实验报告（实验操作流程、基因编辑细胞系生物信息学解读结果）。
案例展示
敲除293T细胞的ICAM5基因
（1）将基因编辑载体转入细胞系后，经抗生素筛选，在靶点处有套峰，表明已有细胞敲除成功。
抗生素筛选敲除ICAM5基因的293T细胞测序图
（2）用培养皿进行初筛，基本为双峰，保证后续挑的单克隆均已敲除。
培养皿初筛敲除ICAM5基因的293T细胞单克隆测序图
（3）将（2）筛岀的细胞再用96孔板筛单克隆细胞，保证得到的细胞为敲除了目的基因的单克隆细胞。
96孔板筛敲除ICAM5基因的293T细胞单克隆测序图
（4）最终得到了两种基因编辑单克隆细胞系。
96孔板筛敲除ICAM5基因的293T细胞单克隆基因型
