拉下实验(Pull-down assay)
适用场景
1、用于验证两个已知蛋白的相互作用;
2、筛选与已知蛋白相互作用的未知蛋白。
图 Pull-down验证蛋白互作原理图
实验周期
2、GST标记可把一些难溶蛋白变成可溶蛋白,使实验变得更易操作;
3、GSH谷胱甘肽偶联球珠亲和力强,洗脱纯度高。
拉下实验(Pull-down)的缺点
1、两个非同一定位的蛋白可能因电荷或是强亲和力的原因造成假阳性,需用其他方法再次验证,例如Co-IP等;
2、验证互作是在试管中进行的生化反应,不能够完全反映细胞内蛋白真实互作的状态;
3、融合表达的GST标签,肽链较长,可能会改变原目的蛋白的原有的折叠结构。
1、探针基因和靶基因相关序列信息;
2、样品种属及类型;
3、如需进行特异性WB检测,客户需要提供特异性一抗;
4、尽可能丰富的相关资料、文献。
实验信息
实验过程中客户可以随时登入管理系统查看项目实时进展情况。实验结题时系统会通过短信自动通知客户,并发送实验报告查看网址。实验结题后,实验报告、检测结果可在线查看或打印,并永久保留。
撰写文章时,该实验可引用以下参考文献
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