背景介绍
烟草(Nicotiana tabacum)是茄科烟草属一年生或多年生的经济作物。烟草易于进行组织培养,转化效率较高,是植物基因工程和分子生物学研究中重要的模式植物。
以烟草叶片作为转基因受体材料,用携带目标基因载体的农杆菌侵染受体材料,将T-DNA插入到基因组中,经过对应抗性的抗生素筛选,获得独立的抗性愈伤组织,进一步分化并再生为转基因株系。

图 烟草遗传转化
2、高效的实验流程。对于常用烟草品种,常年预备充足的无菌苗,可随时开展遗传转化项目;采用农杆菌转化法,快速、高效、稳定、单拷贝插入为主,支持潮霉素、G418、Basta、草甘膦、甘露糖等多种真核抗性筛选。根据我司多年的实验经验,使用草丁膦抗性实验成功率更高,同时周期更短,推荐各位老师同学优先选择。
3、完善的服务支持。前期提供专业的技术咨询和指导,优化项目;实验中随时沟通交流,及时了解进展;项目完成后根据合同提供约定的结果。
4、 我司提供烟草繁种服务,特别适合无暇管理繁种工作或遇特殊季节无法进行繁种的客户。
客户提供质粒要求:
• 浓度:80-100ng/μL;
• 体积:≥10μL;
• 质粒无降解。
注:质粒出现降解会影响后续实验,运输过程中可加冰袋或干冰避免此类问题。
客户提供大肠杆菌要求:
• 大肠杆菌菌液或菌板均可。菌液:1年以内的菌液,加甘油保存;菌板:一周内活化的菌板。
客户提供农杆菌要求:
• 农杆菌菌液或菌板均可。菌液:1年以内的菌液,加甘油保存;菌板:一周内活化的菌板。
注:推荐客户提供质粒,大肠杆菌和农杆菌在邮寄过程中很容易发生污染。
2、需提供一年以内成熟种子≥30粒。
3、如客户提供的品种特殊,将增加实验时间,同时,需提供更多数量的种子,具体阳性苗数可根据客户的要求进行协商。
4、我司默认提供独立T0代苗,以抗性基因PCR鉴定阳性结果作为结题标准;对于基因编辑苗我司提供阳性T0代苗,并提供具体的突变信息。
真核抗性筛选推荐
Hyg>Basta>G418
实验流程
客户在线下单—订单/实验材料确认—烟草无菌苗培养—农杆菌侵染—筛选—分化—生根—检测—快递遗传转化阳性苗
客户下单及项目信息填写
在我司官网http://www.biorun.com/进行注册或登录,请客户按照页面提示填写农杆菌菌株名称、载体抗性、受体材料所属物种(烟草)等信息,价格由系统自动计算。
点击下单
实验交付结果
1、每个标准转化按照以下表格提供阳性株系,也可以根据客户要求提供任意数量的独立转化株系,多出部分根据实际情况进行收费;
①胶图:白底胶图,条带单一,无杂带。阳性菌亮,阴性苗与阴性水不亮,阳性苗与阳性菌条带一致,检测苗子棵数正确。
2、实验数据及图片;
3、该项目的实验报告。
撰写文章时,该实验可引用以下参考文献
Sunilkumar G, Vijayachandra K, Veluthambi K. Preincubation of cut tobacco leaf explants promotes Agrobacterium-mediated transformation by increasing vir gene induction. Plant Science, 1999. 141(1):51-58.