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遗传转化服务

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详细介绍Detailed Introduction

拟南芥遗传转化服务

背景介绍
       拟南芥(Arabidopsis thaliana)与油菜、萝卜、卷心菜等同为十字花科植物,又名鼠耳芥、阿拉伯芥、阿拉伯草,广泛用于植物遗传学、发育生物学和分子生物学的研究,是一种典型的模式植物。拟南芥植株较小、生长周期短(从发芽到开花约4-6周)、结实多(每株可产生数干粒种子)、具有明显的形态特征(利于突变体表型的观察)、基因组较小、遗传操作简便。经过不断的实践,浸花法(floral tip)已成为拟南芥遗传转化最常用的方法。

实验原理
       以花序作为转基因受体材料,用携带目标基因载体的农杆菌侵染花序,将T-DNA插入到基因组中,使用对应抗性的抗生素对种子进行筛选,获得抗性种子T0代,继续种植收获T1代种子(可选)。


图 拟南芥遗传转化过程

技术优势
1、我司拥有多年从事植物遗传转化的专业技术团队,可保障实验成功率。
2、高效的实验流程。全年不间断种植野生型拟南芥,可随时开展遗传转化项目;采用农杆菌浸花转化法,快速、高效、稳定、单拷贝插入为主,支持潮霉素、G418、Basta、甘露糖等多种真核抗性筛选。根据我司多年的实验经验,使用草丁膦抗性筛选实验成功率更高,同时周期更短,推荐各位老师同学优先选择。
3、完善的服务支持。前期提供专业的技术咨询和指导,优化项目;实验中随时沟通交流,及时了解进展;项目完成后根据合同提供约定的结果。

备注
1、  客户可直接提供构建好的拟南芥转化载体,也可委托我司进行相关载体构建服务。
客户提供质粒要求:
• 浓度:80-100ng/μL;
• 体积:≥10μL;
• 质粒无降解。
注:质粒出现降解会影响后续实验,运输过程中可加冰袋或干冰避免此类问题。
客户提供大肠杆菌要求:
• 大肠杆菌菌液或菌板均可。菌液:1年以内的菌液,加甘油保存;菌板:一周内活化的菌板。
客户提供农杆菌要求:
• 农杆菌菌液或菌板均可。菌液:1年以内的菌液,加甘油保存;菌板:一周内活化的菌板。
注:推荐客户提供质粒,大肠杆菌和农杆菌在邮寄过程中很容易发生污染。
2、我司默认使用拟南芥哥伦比亚(Columbia)野生型为转化受体材料,客户如指定受体材料为突变体或其他品种,将另行协商具体服务事项。
3、我司提供独立的转基因株系,以抗性基因PCR鉴定阳性结果作为结题标准;对于基因编辑苗我司提供阳性转基因株系的具体突变情况。

实验流程
客户在线下单—订单/实验材料确认—已有花序的拟南芥—农杆菌侵染花序—筛选—T0代种子—种植并筛选—检测苗—收T1代种子(可选项)—按客户需求快递转基因种子或苗

可转品种
目前我司转化的比较多的主要是哥伦比亚野生型,突变体、其他品种等也可进行转化。

客户下单及项目信息填写
在我司官网http://www.biorun.com/进行注册或登录,请客户按照页面提示填写农杆菌菌株名称、载体抗性、受体材料所属物种(拟南芥)等信息,价格由系统自动计算。

实验信息
在实验开始、结题关键节点系统会自动发送短信到申请人手机进行告知,实验过程中客户可以随时登录客户管理系统查看项目实时进展情况。实验结题后,实验报告、检测结果可在线查看,并永久保留。实验过程用到的菌株、载体、受体材料免费为客户保存半年后销毁。

实验交付结果
1、每个转化提供T0代苗或T1代种子,也可以根据客户要求提供T2、T3、T4代种子,超出部分根据实际情况进行收费;
2、实验数据及图片;
3、该项目的实验报告

 


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